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恒鑫牌THI消泡剂

丙酮丁醇菌消泡剂种母的制备

发布时间:2012-07-14 10:44:58

在发酵行业运用消泡剂是必须的,而丙酮丁醇菌的分离与纯化同样需要丙酮丁醇菌消泡剂的协助,达到理想的效果。 一、丙酮丁醇菌的分离与纯化方法 在土壤、细泥、粪便中及新鲜果实、蔬菜的表面上,均有丙酮丁醇菌存在。利用它的孢子的嫌气性和耐热性,并配合使用丙酮丁醇菌消泡剂,可以采用热淘汰法和单细胞分离法,以获得优良的菌种。由于丙酮、丁醇发酵时,易受杂菌侵染而导致酸败,所以,丙酮丁醇工厂必须经常进行菌种的分离与纯化工作,以保证正常生产。 所谓热淘汰法,即将含有丙酮丁醇菌的试样接入5%的玉米醪试管内,再放在沸水浴中1-1.5 min,杀死不耐热的杂菌和热抵抗力较差的孢子,而保留对热抵抗力较强的丙酮丁醇菌孢子,然后在嫌气状态下培养。培养液产生大量气体,醪盖上升,这时可转接到新鲜培养基试管内,同法进行热淘汰和嫌气培养,如此反复多次,即可获得较好的菌株。欲获得纯培养或者需从发酵醪中选取优良菌株,可用嫌气平板进行单菌落分离。如用有明胶或碳酸钙的培养基,则可能出现溶解圈。然后接入玉米醪中测定气体产生量,醪盖上升情况和丙酮产量。获得的优良菌种用沙土管保存。 二、丙酮丁醇菌扩大培养 丙酮丁醇菌通过丙酮丁醇菌消泡剂进行扩大培养,可以得到优良的丙酮丁醇菌种。沙土孢子—试管—种子瓶—第一种母罐—第二种母罐—发酵罐。 1.试管菌种的培养:选取优良菌种的砂土孢子1-2g,接入10ml5%浓度的玉米醪与丙酮丁醇菌消泡剂中,并将此管在100℃沸水中热处理1-2 min,急速冷却至37℃,然后置于真空干燥器内进行培养(2 666 Pa以下温度保持在37-39℃)。 2.种母瓶培养:将一支试管菌种接种到盛有5%浓度的玉米醪液的种母瓶中,在常压下培养24h,即可接入第一种母瓶。一般丙酮丁醇菌孢子萌发时,要求嫌气条件较高,营养体繁殖时,由于本身产生的H2和CO2与添加的丙酮丁醇菌消泡剂已能满足嫌气条件。 3.第一种母罐:其中盛有6%浓度的玉米醪接入种母瓶的醪液,培养12-15h后,即可接入第二种母罐。 4.第二种母罐:其中盛有8%浓度的玉米醪,接入第一种母罐醪液,培养20 h左右,然后将总量1/3~1/2送入发酵罐。
 制备种醪的方法有间歇调制种醪法,半连续调制种醪法,利用部分发酵醪制种醪法。
本文参考《发酵微生物学》一书。
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