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发酵工业微生物菌种的分离和选育

发布时间:2013-06-13 15:42:51

从自然界中得到的微生物菌种往往产值不高,达不到出产需求。因而,大家在知道和知道微生物特性的基础上,应用微生物遗传变异及代谢调控理论,经过操控微生物的成长代谢条件,格外是以物理或化学要素诱发微生物骤变而发生优秀性状,迸一步挑选出高产菌株。 分子生物学的开展、基因工程技能的应用,为发酵工业供给了更为较好的育种手法。由此不只可以定向地进步发酵产率,而且还可得到新的工程菌株,出产微生物不能发生的各种蛋门质和肽类,如胰岛素、搅扰紊等。 发酵下业运用的微生物菌种,开始都是从自然界中别离挑选出来的。要从自然界找到咱们所需求的优秀菌种,首要有必要把它们从许多的杂菌中别离出来,然后依据出产需求和菌种特性,选用各种不一样的挑选办法,选出功能杰出的纯种。别离与挑选菌种的具体做法通常分为4个步骤,即样品收集、增殖培育、纯种别离和出产功能测定。 在自然界取得的样品,是许多品种微生物的混杂物,通常选用平板划线或平板稀释法进行纯种别离。为了添加别离成功率,可经过富集培育添加待别离菌的数最。即是运用不一样品种的微生物其成长繁衍对环境和养分需求的不一样,如温度、pH、渗透压、氧气、碳源、氮源等,人为操控这些条件,使之利于某类或某种微生物成长,而不利于其他品种微生物的生计,以到达使意图菌种占优势,而得以疾速别离纯化的意图。这种办法又被称为施加选择性压力别离法。 操控培育时的氧气,可将好氧和厌氧微生物分隔;在高温下培育,可将嗜热微生物和非嗜热微生物分隔;操控不一样的pH条件,可别离出嗜酸或嗜碱微生物;运用高糖或高盐的培育基进行培育,可取得耐高渗透压的微生物;控翩培育基的各种养分成分,均可使能运用此种养分的微生物被富集,然后很多取得。 在别离培育基中也广泛选用参加不一样的抗生素或试剂来添加选择性。如在别离放线菌和细菌时,可参加抗真菌抗生素;别离真菌时,可参加抗细菌抗生素。培育办法可选用分批式富集培育(摇瓶培育)和恒化式富集培育(接连培育)两种办法。 分批式富集培育是指将富集培育物转接到新的同一种培育基中,从头树立选择性压力,如此重复转种几回后,再取此富集培育物接种到固体培育基上,以取得单菌落。这种分批式富集培育中,转种的时刻是要害应在所需菌种占优势情况下转种。 恒化式富集培育技能是经过改动限制性基质的浓度,来操控两类不一样菌株的比成长速率。因而可经过改动稀释速率进行接连富集培育,取得所需求的菌种。用接连富集培育技能别离出来的菌种,格外合适用于接连发酵出产,而分批式富集培育钝化办法别离得到的菌株,在接连发酵出产中的体现很差。 接连富集培育办法还可以用于别离习惯某种工业出产需求特性的菌株,如能习惯简略培育基的菌种,这样不只可以下降出产成本,且不易染菌。还可进步别离温度,有可以别离出耐高温菌株,在出产中节省冷却水。用接连富集培育办法也可挑选出能共生的安稳混合菌群。 固体培育基常用于别离各种酶发生菌,在固体选择性培育基中参加酶效果的底物培育微生物,可以运用此底物的酶发生菌得以成长,而且往往会在其菌落周围构成一通明圈。通明圈的巨细虽不能与酶生机的凹凸彻底成正比,但彻底可以作为菌种初筛的判别规范。像蛋白酶、脂肪酶、果胶酶、甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶等酶发生菌,都可用这个办法进行挑选。 本文参考《发酵工程原理与技术》一书。
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